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Título: MATURAÇÃO DA LINHA ERITRÓIDE NA MEDULA ÓSSEA POR CITOMETRIA DE FLUXO
Autor: Queirós, M. L.
Cerejo, L.
Leander, M.
Freitas, I.
Cleto, E.
Barbot, J.
Gonçalves, M.
Santos, M.
Santos, A.
Fonseca, S.
Lau, C.
Teixeira, M. A.
Pinho, L.
Santos-Silva, A.
Lima, M.
Data: 1-Jul-2011
Editora: Gabinete Coordenador de Investigação
Resumo: MATURAÇÃO DA LINHA ERITRÓIDE NA MEDULA ÓSSEA POR CITOMETRIA DE FLUXO Maria Luís Queirós1,2,3, Liliana Cerejo1,4, Magdalena Leander1,3, Inês Freitas3,5, Esmeralda Cleto3,6, José Barbot3,7, Marta Gonçalves1,3, Marlene Santos1,3, Ana Helena Santos1,3,8, Sónia Fonseca1,3, Catarina Lau1,3, Maria Anjos Teixeira1,3, Luciana Pinho1,3, Alice Santos-Silva2, Margarida Lima1,3,8 1Serviço Hematologia Clínica, Laboratório de Citometria, HSA/CHP; 2Serviço de Bioquímica, FF/UP; 3UMIB/ICBAS/UP; 4Mestrado em Análises Clínicas e Saude Pública, ICS/UCP; 5Serviço de Hematologia Laboratorial, HSA/CHP; 6Serviço de Pediatria, HMP/CHP e HSA/CHP; 7Unidade de Hematologia Pediátrica, HMP/CHP; 8Consórcio Euroflow. Hospital de Santo António, Centro Hospitalar do Porto (HSA/CHP), Porto. Faculdade de Farmácia, Universidade do Porto (FF/UP), Porto. Unidade Multidisciplinar de Investigação Biomédica, Instituto de Ciências Biomédicas Abel Salazar, Universidade do Porto (UMIB/ICBAS/UP), Porto. Instituto de Ciências da Saúde, Universidade Católica Portuguesa (ICS/UP), Porto. Hospital Maria Pia, Centro Hospitalar do Porto (HSA/CHP), Porto. Consórcio Euroflow. Introdução No processo de maturação dos eritrócitos do sangue (RBC), as células eritróides (ERI) sofrem uma série de mudanças dentro da medula óssea (MO), correspondentes a fases de maturação específicas que são identificadas por microscopia de luz, usando critérios morfológicos e citoquímicos. No entanto, pouco se sabe sobre as alterações imunofenotipicas que caracterizam a maturação ERI normal. Objectivo Caracterizar fenotipicamente as várias fases de maturação da linha eritróide por citometria de fluxo (CF). Material e Métodos Foram estudados por CF 15 aspirados de medula óssea de indivíduos adultos sem doença hematológica. O estudo foi efectuado utilizando o tubo de 8 cores recomendado pelo consórcio Euroflow para o estudo das ERI nas síndromes mielodisplásicos (SMD): anti-CD45 (PO) / anti-HLA-DR (PB) / anti-CD71 (APC-H7) / anti-CD33 (APC) /anti-CD117 (PC7) / anti-CD34 (PERCP Cy5.5) / anti-CD105 (PE) / anti-CD36 (FITC). As amostras foram adquiridas no citómetro NaviosTM (Becman Coulter) e analisadas com o software Infinicyt (Cytognos). Resultados Utilizando este protocolo identificamos 4 estadios imunofenotípicos, um correspondendo às ERI mais imaturas (estadio 1: CD71+CD36+CD105+CD117+CD34+; média de 0.9%; variando de 0.1 a 1.7%) e três estadios subsequentes caracterizados pela perda sequencial de CD34 (estadio 2: CD71+CD36+CD105+CD117+CD34-; 5.6%, 3.4 a 7.6%), CD117 (estadio 3: CD71+CD36+CD105+CD117-CD34-; 32.2%; 15.6 a 49.8%) e CD105 (estadio 4: CD71+CD36+CD105-CD117-CD34-; 61.3%, 41.1 a 78.2%) Discussão O tubo recomendado pelo Euroflow para o estudo das ERI nos SMD permitiu identificar 4 estadios de diferenciação dos RBC, os quais correspondem provavelmente aos quatro estadios que são identificados convencionalmente por critérios morfológicos: estadios 1 - pró-eritroblastos; estadio 2 - eritroblastos basófilos; estadio 3 - eritroblastos policromáticos; e estadio 4 - eritroblastos ortocromáticos. É necessário efectuar mais estudos para caracterizar melhor estas populações, para as comparar com as obtidas por critérios morfológicos e para as utilizar para identificar e monitorizar alterações nas ERI em várias doenças hematológicas primárias e secundárias. Apresentador: Maria Luís Queirós, Técnica Superior de Saúde, Serviço Hematologia Clínica, Laboratório de Citometria, HSA/CHP; Aluna de Doutoramento em Ciências Farmacêuticas, FF/UP.
Peer review: yes
URI: http://hdl.handle.net/10400.16/781
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