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- NIVEIS DE SUPERÓXIDO DISMUTASE REVELAM STRESS OXIDATIVO AUMENTADO NA POLINEUROPATIA AMILOIDÓTICA FAMILIARPublication . REGUENGO, HENRIQUE; Cardoso, M. L.; Coelho, T.; Martins, A.; Novais, M.; Cruz, M.; Fonseca, Isabel; Martins, B.; Marques, F.NIVEIS DE SUPERÓXIDO DISMUTASE REVELAM STRESS OXIDATIVO AUMENTADO NA POLINEUROPATIA AMILOIDÓTICA FAMILIAR Henrique Reguengo1,2, Maria Luís Cardoso2, Teresa Coelho3, Ana Martins3, Marta Novais3, Madalena Cruz1, Isabel Fonseca3, Berta Martins4, Franklim Marques2 1Serviço de Química Clínica, HSA/CHP, 2FFUP, 3Unidade Clínica de Paramiloidose, HSA/CHP, 4Laboratório de Imunogenética, ICBAS/UP. Hospital de Santo António, Centro Hospitalar do Porto (HSA/CHP), Porto. Faculdade de Farmácia, Universidade do Porto (FF/UP), Porto. Instituto de Ciências Biomédicas Abel Salazar, Universidade do Porto (ICBAS/UP), Porto. Introdução A polineuropatia amiloidótica familiar (PAF) é provocada por mutações no gene da transtirretina, principalmente em resultado da mutação TTRv30M no caso de Portugal. Estudos recentes em vários tipos de amiloidoses revelam que o stress oxidativo pode estar envolvido quer na produção das fibrilas de proteína amilóide, quer na modificações pós formação das fibrilas. A enzima superóxido dismutase (SOD) desempenha um importante papel antioxidante que protege as células expostas aos radicais superóxido. O presente estudo pretendeu avaliar o stress oxidativo nesta patologia. Material e Métodos A amostra em estudo incluiu 40 doentes com PAF e 45 portadores assintomáticos da mutação, seguidos habitualmente na Unidade Clínica de Paramiloidose do CHP. Foi ainda considerado um grupo controlo de 26 indivíduos saudáveis. Avaliou-se a concentração de SOD intra-eritocitária com um método colorimétrico disponível no KIT RANSOD ref SD 125 da Randox. A análise estatística foi efectuada utilizando o software SPSS, versão 19. Resultados Os valores de SOD obtidos foram os seguintes: Controlos: (1208±254 U/g Hb), Portadores assintomáticos (1436±62 U/g Hb), Doentes com PAF (1455±350 U/g Hb). Os valores resultaram da média de três réplicas. Os valores de SOD foram significativamente mais elevados no grupo de doentes com PAF e nos portadores assintomáticos, comparativamente ao grupo controlo (respectivamente P=0.003 e P=0.013). Não foram encontradas diferenças estatisticamente significativas entre os doentes com PAF e os portadores assintomáticos. No grupo de doentes com PAF verificou-se uma correlação positiva significativa entre os valores de SOD e Proteína C reactiva (r=0.45, P =0.013). Conclusão A alteração da concentração da SOD nos doentes com PAF sugere uma maior exposição dos mesmos a fenómenos de stress oxidativo comparativamente ao grupo controlo. Dado que este fenómeno pode ter influência quer no despoletar, quer no curso da patologia da doença, justifica-se uma maior atenção e estudo deste fenómeno nestes doentes. Apresentador: Henrique Reguengo, Técnico Superior de Saúde, Serviço de Quimica Clínica, HSA/CHP; Aluno de Doutoramento em Ciências Farmacêuticas, FF/UP.
- STRESS OXIDATIVO: MARCADORES BIOQUÍMICOSPublication . REGUENGO, HENRIQUE
- Carbidopa Alters Tryptophan Metabolism in Breast Cancer and Melanoma Cells Leading to the Formation of Indole-3-Acetonitrile, a Pro-Proliferative MetabolitePublication . Duarte, D.; Amaro, F.; Silva, I.; Silva, D.; Fresco, P.; Oliveira, José Carlos; REGUENGO, HENRIQUE; Gonçalves, J.; Vale, N.Carbidopa is used for the treatment of Parkinson's disease (PD) as an inhibitor of DOPA decarboxylase, and PD patients taking carbidopa have a lower incidence of various tumors, except for breast cancer and melanoma. Recently, it was shown that carbidopa inhibits tryptophan-2,3-dioxygenase (TDO) and kynureninase enzymes. In the present study, the effect of carbidopa on the viability and metabolic profile of breast cancer MCF-7 and melanoma A375 cells was investigated. Carbidopa was not effective in inhibiting MCF-7 and A375 proliferation. Liquid chromatography and mass spectrometry revealed a new compound, identified as indole-3-acetonitrile (IAN), which promoted a concentration-dependent increase in the viability of both cell lines. The results suggest that treatment with carbidopa may alter tryptophan (Trp) metabolism in breast cancer and melanoma leading to the formation of a pro-proliferative Trp metabolite, which may contribute to its failure in reducing breast cancers and melanoma incidence in PD patients taking carbidopa.
- MARCADORES DE STRESS OXIDATIVO NA POLINEUROPATIA AMILOIDÓTICA FAMILIARPublication . REGUENGO, HENRIQUE; Cardoso, M. L.; Coelho, T.; Martins, A.; Novais, M.; Gomes, L.; Fonseca, Isabel; Martins, B.; Marques, F.MARCADORES DE STRESS OXIDATIVO NA POLINEUROPATIA AMILOIDÓTICA FAMILIAR Henrique Reguengo1,2, Maria Luís Cardoso2, Teresa Coelho3, Ana Martins3, Marta Novais3, Luísa Gomes1, Isabel Fonseca3, Berta Martins4, Franklim Marques2 1Serviço de Química Clínica, HSA/CHP, 2FFUP, 3Unidade Clínica de Paramiloidose, HSA/CHP, 4Laboratório de Imunogenética, ICBAS/UP. Hospital de Santo António, Centro Hospitalar do Porto (HSA/CHP), Porto. Faculdade de Farmácia, Universidade do Porto (FF/UP), Porto. Instituto de Ciências Biomédicas Abel Salazar, Universidade do Porto (ICBAS/UP), Porto. Introdução A Polineuropatia Amilóidotica Familiar (PAF) é uma amiloidose hereditária associada a variantes de transtirretina (TTR), em que ocorre deposição sistémica de amilóide, principalmente a nível dos nervos periféricos. Alguns estudos sugerem que o stress oxidativo pode estar envolvido na formação e modificação das fibrilas de amilóide. Fisiologicamente, o organismo defende-se das agressões mediadas pelos radicais livres utilizando diversas reservas antioxidantes celulares. Estudos realizados revelam diferentes respostas ao stress oxidativo envolvendo o malondialdeído (MDA), a capacidade antioxidante total (TAS), algumas vitaminas (A e E) e enzimas: glutationa reductase (GRed) e a superóxido dismutase (SOD). Objectivos Este estudo pretendeu quantificar alguns marcadores de stress oxidativo e analisar as diferenças entre doentes com PAF e portadores assintomáticos. Material e Métodos Foram incluídos 40 doentes com diagnostico de PAF e 45 portadores assintomáticos da mutação, procedentes da Unidade Clínica de Paramiloidose. Procedeu-se à avaliação da TAS da GRed e da SOD, respectivamente através dos Kit comerciais da Randox TAS NX2332, Glutationa Reductase ref. GR 2368, RANSOD ref. SD 125 e do MDA com o kit comercial da Zeptometrix, OXItek TBARS. Ref. 0801192. A comparação entre os grupos foi efectuada pelo teste t de student para amostras independentes e a relação entre as variáveis pela correlação de Pearson. Resultados Os valores de TAS e GRed foram significativamente mais elevados no grupo de doentes com PAF comparativamente aos portadores assintomáticos (P=0.02 e P=0.03, respectivamente). Entre os dois grupos, não se verificaram diferenças significativas no MDA, SOD e vitaminas A e E. No grupo de doentes com PAF, foi encontrada uma correlação significativa entre a TAS e a função renal avaliada pela creatinina sérica (r=0.60, P=0.01) e pela cistatina C (r=0.51, P=0.01). Nos portadores assintomáticos apenas a creatinina se correlacionou com a TAS, mas não a cistatina C. Apesar do grupo dos doentes com PAF apresentar valores mais elevados de creatinina sérica, as diferenças não foram significativas e o valor máximo apresentado foi de 1,46 mg/dl nos PAF e 1,02 mg/dl nos portadores assintomáticos. Conclusão Apesar do MDA não apresentar diferenças estatisticamente significativas, a capacidade antioxidante parece ser superior nos doentes com PAF comparativamente aos portadores assintomáticos. Os resultados revelam ainda uma correlação positiva significativa entre a TAS e os níveis séricos de creatinina e de cistatina C. É possível que o aumento dos valores de TAS reflicta um mecanismo de defesa ao aumento de stress oxidativo, geralmente associado à disfunção renal, avaliada pela creatinina e pela cistatina C. Apresentador: Henrique Reguengo, Técnico Superior de Saúde, Serviço de Quimica Clínica, HSA/CHP; Aluno de Doutoramento em Ciências Farmacêuticas, FF/UP.
- Serotonin after β-Adrenoreceptors’ Exposition: New Approaches for Personalized Data in Breast Cancer CellsPublication . Correia, Ana Salomé; Duarte, Diana; Silva, Isabel; REGUENGO, HENRIQUE; Oliveira, José Carlos; Vale, NunoSerotonin is an important monoamine in the human body, playing crucial roles, such as a neurotransmitter in the central nervous system. Previously, our group reported that β-adrenergic drugs (ICI 118,551, isoprenaline, and propranolol) influence the proliferation of breast cancer cells (MCF-7 cells) and their inherent production of adrenaline. Thus, we aimed to investigate the production of serotonin in MCF-7 cells, clarifying if there is a relationship between this production and the viability of the cells. To address this question, briefly, we treated the MCF-7 cells with ICI 118,551, isoprenaline, and propranolol, and evaluated cellular viability and serotonin production by using MTT, Sulforhodamine B (SRB) and Neutral Red (NR) assays, and HPLC-ECD analysis, respectively. Our results demonstrate that isoprenaline promotes the most pronounced endogenous synthesis of serotonin, about 3.5-fold greater than control cells. Propranolol treatment also increased the synthesis of serotonin (when compared to control). On the other hand, treatment with the drug ICI 118,551 promoted a lower endogenous synthesis of serotonin, about 1.1-fold less than what was observed in the control. Together, these results reveal that MCF-7 cells can produce serotonin, and the drugs propranolol, isoprenaline and ICI 118,551 influence this endogenous production. For the first time, after modulation of the β-adrenergic system, a pronounced cellular growth can be related to higher consumption of serotonin by the cells, resulting in decreased levels of serotonin in cell media, indicative of the importance of serotonin in the growth of MCF-7 cells.
- A position paper of the EFLM Committee on Education and Training and Working Group on Distance Education Programmes/E-Learning: developing an e-learning platform for the education of stakeholders in laboratory medicinePublication . Gruson, D.; Faure, G.; Gouget, B.; Haliassos, A.; Kisikuchin, D.; REGUENGO, HENRIQUE; Topic, E.; Blaton, V.The progress of information and communication technologies has strongly influenced changes in healthcare and laboratory medicine. E-learning, the learning or teaching through electronic means, contributes to the effective knowledge translation in medicine and healthcare, which is an essential element of a modern healthcare system and for the improvement of patient care. E-learning also represents a great vector for the transfer knowledge into laboratory practice, stimulate multidisciplinary interactions, enhance continuing professional development and promote laboratory medicine. The European Federation of Laboratory Medicine (EFLM) has initiated a distance learning program and the development of a collaborative network for e-learning. The EFLM dedicated working group encourages the organization of distance education programs and e-learning courses as well as critically evaluate information from courses, lectures and documents including electronic learning tools. The objectives of the present paper are to provide some specifications for distance learning and be compatible with laboratory medicine practices.