Browsing by Author "Teixeira, M. A."
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- MATURAÇÃO DA LINHA ERITRÓIDE NA MEDULA ÓSSEA POR CITOMETRIA DE FLUXOPublication . Queirós, M. L.; Cerejo, L.; Leander, M.; Freitas, I.; Cleto, E.; Barbot, J.; Gonçalves, M.; Santos, M.; Santos, A.; Fonseca, S.; Lau, C.; Teixeira, M. A.; Pinho, L.; Santos-Silva, A.; Lima, M.MATURAÇÃO DA LINHA ERITRÓIDE NA MEDULA ÓSSEA POR CITOMETRIA DE FLUXO Maria Luís Queirós1,2,3, Liliana Cerejo1,4, Magdalena Leander1,3, Inês Freitas3,5, Esmeralda Cleto3,6, José Barbot3,7, Marta Gonçalves1,3, Marlene Santos1,3, Ana Helena Santos1,3,8, Sónia Fonseca1,3, Catarina Lau1,3, Maria Anjos Teixeira1,3, Luciana Pinho1,3, Alice Santos-Silva2, Margarida Lima1,3,8 1Serviço Hematologia Clínica, Laboratório de Citometria, HSA/CHP; 2Serviço de Bioquímica, FF/UP; 3UMIB/ICBAS/UP; 4Mestrado em Análises Clínicas e Saude Pública, ICS/UCP; 5Serviço de Hematologia Laboratorial, HSA/CHP; 6Serviço de Pediatria, HMP/CHP e HSA/CHP; 7Unidade de Hematologia Pediátrica, HMP/CHP; 8Consórcio Euroflow. Hospital de Santo António, Centro Hospitalar do Porto (HSA/CHP), Porto. Faculdade de Farmácia, Universidade do Porto (FF/UP), Porto. Unidade Multidisciplinar de Investigação Biomédica, Instituto de Ciências Biomédicas Abel Salazar, Universidade do Porto (UMIB/ICBAS/UP), Porto. Instituto de Ciências da Saúde, Universidade Católica Portuguesa (ICS/UP), Porto. Hospital Maria Pia, Centro Hospitalar do Porto (HSA/CHP), Porto. Consórcio Euroflow. Introdução No processo de maturação dos eritrócitos do sangue (RBC), as células eritróides (ERI) sofrem uma série de mudanças dentro da medula óssea (MO), correspondentes a fases de maturação específicas que são identificadas por microscopia de luz, usando critérios morfológicos e citoquímicos. No entanto, pouco se sabe sobre as alterações imunofenotipicas que caracterizam a maturação ERI normal. Objectivo Caracterizar fenotipicamente as várias fases de maturação da linha eritróide por citometria de fluxo (CF). Material e Métodos Foram estudados por CF 15 aspirados de medula óssea de indivíduos adultos sem doença hematológica. O estudo foi efectuado utilizando o tubo de 8 cores recomendado pelo consórcio Euroflow para o estudo das ERI nas síndromes mielodisplásicos (SMD): anti-CD45 (PO) / anti-HLA-DR (PB) / anti-CD71 (APC-H7) / anti-CD33 (APC) /anti-CD117 (PC7) / anti-CD34 (PERCP Cy5.5) / anti-CD105 (PE) / anti-CD36 (FITC). As amostras foram adquiridas no citómetro NaviosTM (Becman Coulter) e analisadas com o software Infinicyt (Cytognos). Resultados Utilizando este protocolo identificamos 4 estadios imunofenotípicos, um correspondendo às ERI mais imaturas (estadio 1: CD71+CD36+CD105+CD117+CD34+; média de 0.9%; variando de 0.1 a 1.7%) e três estadios subsequentes caracterizados pela perda sequencial de CD34 (estadio 2: CD71+CD36+CD105+CD117+CD34-; 5.6%, 3.4 a 7.6%), CD117 (estadio 3: CD71+CD36+CD105+CD117-CD34-; 32.2%; 15.6 a 49.8%) e CD105 (estadio 4: CD71+CD36+CD105-CD117-CD34-; 61.3%, 41.1 a 78.2%) Discussão O tubo recomendado pelo Euroflow para o estudo das ERI nos SMD permitiu identificar 4 estadios de diferenciação dos RBC, os quais correspondem provavelmente aos quatro estadios que são identificados convencionalmente por critérios morfológicos: estadios 1 - pró-eritroblastos; estadio 2 - eritroblastos basófilos; estadio 3 - eritroblastos policromáticos; e estadio 4 - eritroblastos ortocromáticos. É necessário efectuar mais estudos para caracterizar melhor estas populações, para as comparar com as obtidas por critérios morfológicos e para as utilizar para identificar e monitorizar alterações nas ERI em várias doenças hematológicas primárias e secundárias. Apresentador: Maria Luís Queirós, Técnica Superior de Saúde, Serviço Hematologia Clínica, Laboratório de Citometria, HSA/CHP; Aluna de Doutoramento em Ciências Farmacêuticas, FF/UP.
- OS NÍVEIS DE EXPRESSÃO DE CD52 NAS CÉLULAS DE SÉZARY PODERÃO SER ÚTEIS PARA AJUDAR A PREVER A RESPOSTA DOS DOENTES COM SÍNDROME DE SÉZARY AO TRATAMENTO COM ALEMTUZUMAB?Publication . Fernandes, I.; Gonçalves, M.; Lau, C.; Teixeira, M. A.; Gonçalves, C.; Xavier, L.; Coutinho, J.; Selores, M.; Alves, R.; Lima, M.OS NÍVEIS DE EXPRESSÃO DE CD52 NAS CÉLULAS DE SÉZARY PODERÃO SER ÚTEIS PARA AJUDAR A PREVER A RESPOSTA DOS DOENTES COM SÍNDROME DE SÉZARY AO TRATAMENTO COM ALEMTUZUMAB? Iolanda Fernandes1, Marta Gonçalves2, Catarina Lau2, Maria dos Anjos Teixeira2, Cristina Gonçalves2, Luciana Xavier2, Jorge Coutinho2, Manuela Selores1, Rosário Alves1,3,4, Margarida Lima2,3,4 1Serviço de Dermatologia, 2Serviço de Hematologia Clínica, 3Consulta Multidisciplinar de Linfomas Cutâneos, HSA/CHP, 4UMIB/ICBAS/UP. Hospital de Santo António, Centro Hospitalar do Porto (HSA/CHP), Porto. Unidade Multidisciplinar de Investigação Biomédica, Instituto de Ciências Biomédicas Abel Salazar, Universidade do Porto (UMIB/ICBAS/UP), Porto. Introdução O Alemtuzumab (Altz) é um anticorpo monoclonal (AcMo) humanizado específico para o CD52, expresso em diferentes níveis na maioria dos leucócitos, incluindo linfócitos T e B, células NK, monócitos e neutrófilos. Estudos recentes mostraram que o Altz é eficaz no tratamento de neoplasias de células T periféricas, incluindo a Síndrome de Sezary (SS), uma forma rara de linfoma T cutâneo. Embora alguns doentes com SS sejam refractários ao tratamento com Altz, até ao momento não há estudos que avaliem a relação entre a expressão de CD52 nas Células de Sezary (CS) e a resposta à terapêutica. Objectivos Avaliar se a resposta ao tratamento com Altz tem relação com os níveis de expressão de CD52 nas CS. Material e métodos Estudamos a expressão de CD52 nas CS em 5 doentes com SS tratados com Altz subcutâneo em baixa dose, comparando-a com a observada nos restantes leucócitos, em particular nos linfócitos T CD4 normais. As CS foram caracterizadas por citometria de fluxo usando AcMo específicos para diferentes moléculas expressas nos linfócitos T, assim como para diferentes famílias de regiões variáveis da cadeia beta do receptor da célula T, e quantificadas no sangue antes e diferentes tempos após o início do tratamento. Resultados Quatro doentes tiveram boa resposta ao tratamento com Altz, com diminuição acentuada da eritrodermia, do prurido e das CS circulantes. Nesses casos, as CS expressavam CD52 com intensidade forte, igual ou superior à observada nos linfócitos T CD4+ normais residuais. Um dos doentes não respondeu ao tratamento, nem do ponto de vista clínico nem do ponto de vista analítico. Neste caso, as CS expressavam CD52 com intensidade muito fraca, inferior à observada nos neutrófilos, mas os níveis de expressão de CD52 nos restantes leucócitos eram normais. Conclusões Os nossos resultados confirmam os estudos prévios que indicam que o Altz é eficaz no tratamento da maioria dos doentes com SS. Para além disso, indicam que embora na maioria dos casos de SS as CS expressem CD52 com intensidade forte, em alguns casos apresentam uma deficiência selectiva desta molécula. Sugerem ainda que a resposta ao tratamento com Altz está relacionada com os níveis de expressão de CD52 nas CS e que esta deve ser avaliada em todos os doentes propostos para tratamento com este AcMo. É necessário estudar mais casos para determinar se a expressão de CD52 nas CS deve ser usada como biomarcador preditivo da resposta à terapêutica com Altz. Apresentador: Iolanda Fernandes, Médica Interna de Dermatovenerologia, Serviço de Dermatologia, HSA/CHP.